Splicing abnormalities caused by a novel mutation in the PHKA2 gene in children with glycogen storage disease type IX / 中华肝脏病杂志

Objective: Glycogen storage disease type IX (GSD-IX) is a rare primary glucose metabolism abnormality caused by phosphorylase kinase deficiency and a series of pathogenic gene mutations. The clinical characteristics, gene analysis, and functional verification of a mutation in a child with hepatomegaly are summarized here to clarify the pathogenic cause of the disease. Methods: The clinical data of a child with GSD-IX was collected. Peripheral blood from the child and his parents was collected for genomic DNA extraction. The patient's gene diagnosis was performed by second-generation sequencing. The suspected mutations were verified by Sanger sequencing and bioinformatics analysis. The suspected splicing mutations were verified in vivo by RT-PCR and first-generation sequencing. Results: Hepatomegaly, transaminitis, and hypertriglyceridemia were present in children. Liver biopsy pathological examination results indicated glycogen storage disease. Gene sequencing revealed that the child had a c.285 + 2_285 + 5delTAGG hemizygous mutation in the PHKA2 gene. Sanger sequencing verification showed that the mother of the child was heterozygous and the father of the child was of the wild type. Software such as HSF3.1 and ESEfinder predicted that the gene mutation affected splicing. RT-PCR of peripheral blood from children and his mother confirmed that the mutation had caused the skipping of exon 3 during the constitutive splicing of the PHKA2 gene. Conclusion: The hemizygous mutation in the PHKA2 gene (c.285 + 2_285 + 5delTAGG) is the pathogenic cause of the patient's disease. The detection of the novel mutation site enriches the mutation spectrum of the PHKA2 gene and serves as a basis for the family's genetic counseling.

Deficiencia en glucogeno sintetasa hepatica o glucogenosis tipo cero: fenotipo menos severo con defecto enzimático parcial / Hepatic glycogen synthetase deficiency or glycogen storage disease-zero: mild phenotype with partial enzymatic defect

En los 26 años transcurridos desde la descripción original de la deficiencia en glucógeno sintetasa hepática, sólo una observación casuística más fue referida en 1977. Nosotros presentamos los estudios efectuados en un niño argentino de ascendencia italiana quién manifestó a partir de los 21 meses de edad, signos de disfunción hepática con escasa sintomatología clínica que contrastaba con una muy marcada metamorfosis grasa de su hígado. Una respuesta totalmente atípica a la sobrecarga con fructosa fue la clave inicial de orientación diagnóstica. El glucagon no modificó significativamente los niveles de glucosa después de un ayuno de 12 horas pero sí elevó la glucemia, con caída del lactato y alanina a las 3 horas de una comida. Un perfil metabólico de 24 horas demostró hipoglucemia, hipercetonemia, bajas concentraciones de alanina y moderada lactoacidemia en ayunas e hiperglucemia y marcado aumento del lactato en condiciones postprandiales; este perfil reducido a 14 horas, 12 horas de ayuno y a 2 horas posteriores a una ingesta, reveló iguales alteraciones en un hermano menmor asintomático. El curso de la investigación condujo a una segunda biopsia hepática que confirmó la esteatosis hepática y al examen ultraestructural alteracioens subcelulares en hígado y tambien en músculo; además se comprobó el bajo contenido del flucogéno hepático y una actividad de la glucógeno sintetasa entre el 20,25% de los controles siendo por el contrario normal la actividad de la enzima en músculo y en fibroblastos cultivados de una biopsia de piel. La falta de expresión clínica de la hipoglucemia, incluyendo convulsiones y/o retardo mental y un desarrollo pondoestatural normal, señalan a esta casuística argentina como una variante menos severa de la enfermedad respecto a las descripciones previas, observación que podría estar en correlación al defecto parcial en la actividad de la glucógeno sintetasa hepática